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Beta-D-2'-desoxi-2'-fluoro-2'-C-metilcitidina (PSI-6130) é um potente inibidor específico da síntese de RNA do vírus da hepatite C (HCV) em células de replicon Huh-7.Para inibir a HCV NS5B RNA polimerase, o PSI-6130 deve ser fosforilado na forma 5'-trifosfato.A fosforilação do PSI-6130 e a inibição do HCV NS5B foram investigadas.A fosforilação de PSI-6130 por 2'-desoxicitidina quinase humana recombinante (dCK) e uridina-citidina quinase 1 (UCK-1) foi medida usando uma reação espectrofotométrica acoplada.PSI-6130 mostrou ser um substrato para dCK purificada, com um Km de 81 microM e um kcat de 0,007 s-1, mas não foi um substrato para UCK-1.PSI-6130 monofosfato (PSI-6130-MP) foi eficientemente fosforilado ao difosfato e subsequentemente ao trifosfato pela UMP-CMP quinase humana recombinante e nucleosídeo difosfato quinase, respectivamente.Foi estudada a inibição de polimerases de ARN NS5B de HCV de tipo selvagem e mutado (S282T).A constante de inibição em estado estacionário (Ki) para PSI-61 30 trifosfato (PSI-6130-TP) com a enzima de tipo selvagem foi de 4,3 microM.Resultados semelhantes foram obtidos com trifosfato de 2'-C-metiladenosina (Ki=1,5 microM) e trifosfato de 2'-C-metilcitidina (Ki=1,6 microM).O NS5B com a mutação S282T, que é conhecido por conferir resistência à 2'-C-metiladenosina, foi inibido pelo PSI-6130-TP tão eficientemente quanto o tipo selvagem.A incorporação de PSI-6130-MP no RNA catalisada pela polimerase de RNA NS5B purificada resultou na terminação da cadeia.