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X-gal (também abreviado BCIG para 5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido) é um composto orgânico que consiste em galactose ligada a um indol substituído.O composto foi sintetizado por Jerome Horwitz e colaboradores em 1964. O nome químico formal é frequentemente abreviado para frases menos precisas, mas também menos incômodas, como bromocloroindoxil galactosídeo.O X do indoxil pode ser a fonte do X na contração X-gal.X-gal é freqüentemente usado em biologia molecular para testar a presença de uma enzima, β-galactosidase, no lugar de seu alvo usual, um β-galactosídeo.Também é usado para detectar a atividade dessa enzima em histoquímica e bacteriologia.X-gal é um dos muitos glicosídeos e ésteres de indoxil que produzem compostos azuis insolúveis semelhantes ao corante índigo como resultado da hidrólise catalisada por enzimas.

X-gal é um análogo da lactose e, portanto, pode ser hidrolisado pela enzima β-galactosidase que cliva a ligação β-glicosídica na D-lactose.X-gal, quando clivado pela β-galactosidase, produz galactose e 5-bromo-4-cloro-3-hidroxiindol - 1. Este último dimeriza espontaneamente e é oxidado em 5,5'-dibromo-4,4'-dicloro -índigo - 2, um produto intensamente azul e insolúvel.O próprio X-gal é incolor, portanto, a presença do produto de cor azul pode, portanto, ser usada como um teste para a presença de β-galactosidase ativa.Isso também permite que a β-galactosidase bacteriana (chamada lacZ) seja usada como repórter em várias aplicações.

Na análise de dois híbridos, a β-galactosidase pode ser usada como um repórter para identificar proteínas que interagem entre si.Neste método, as bibliotecas de genoma podem ser rastreadas para interação de proteína usando levedura ou sistema bacteriano.Onde houver uma interação bem-sucedida entre as proteínas que estão sendo rastreadas, isso resultará na ligação de um domínio de ativação a um promotor.Se o promotor estiver ligado a um gene lacZ, a produção de β-galactosidase, que resulta na formação de colônias de pigmentação azul na presença de X-gal, indicará, portanto, uma interação bem-sucedida entre as proteínas.Esta técnica pode ser limitada a bibliotecas de triagem de tamanho inferior a cerca de 106. A clivagem bem-sucedida de X-gal também cria um odor visivelmente desagradável devido à volatilização do indol.

Como o próprio X-gal é incolor, a presença do produto de cor azul pode ser usada como teste para a presença de uma β-galactosidase ativa.

Essa fácil identificação de uma enzima ativa permite que o gene da βgalactosidase (o gene lacZ) seja usado como um gene repórter em várias aplicações.