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Anteriormente, estabelecemos uma cultura tridimensional de longo prazo de organoides de tecidos de camundongos (intestino, estômago, pâncreas e fígado) e intestino e pâncreas humanos.Aqui descrevemos as condições necessárias para a cultura tridimensional de longo prazo de células-tronco gástricas humanas.A tecnologia pode ser aplicada para estudar a resposta epitelial à infecção por Helicobacter pylori. Geramos organoides a partir de amostras cirúrgicas de corpos gástricos humanos.As condições de cultura foram desenvolvidas com base naquelas para os sistemas gástricos e intestinais de camundongos.Usamos microinjeção para infectar os organoides com H pylori.As respostas epiteliais foram medidas usando microarray e análises quantitativas de reação em cadeia da polimerase. As células gástricas humanas foram expandidas indefinidamente em culturas tridimensionais.Cultivamos células de tecidos gástricos saudáveis, células-tronco isoladas ou tecidos tumorais.Os organoides mantiveram muitas características de seus respectivos tecidos com base em sua histologia, expressão de marcadores e euploidia.Organoides de tecido saudável expressaram marcadores de 4 linhagens do estômago e se auto-organizaram em domínios de glândula e fossa.Eles podem ser direcionados para expressar especificamente linhagens da glândula gástrica ou da cavidade gástrica, por adição de nicotinamida e retirada de WNT.Embora as linhagens das fossas gástricas tivessem apenas reações marginais à infecção bacteriana, as linhagens das glândulas gástricas apresentaram uma forte resposta inflamatória. Desenvolvemos um sistema para cultivar organoides gástricos humanos.Este sistema pode ser usado para estudar a infecção por H pylori e outras patologias gástricas.Copyright © 2015 AGA Institute.Publicado pela Elsevier Inc. Todos os direitos reservados.