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1.Estudamos os efeitos inibitórios da isorhamnetina na tirosinase de cogumelos por cinética de inibição e simulação computacional.A isorhamnetina inibiu reversivelmente a tirosinase de forma mista em Ki=0,235±0,013 mM.Medições de fluorescência intrínseca e de ligação de 1-anilinonaftaleno-8-sulfonato (ANS) mostraram que a isorhamnetina não induziu alterações significativas na estrutura terciária da tirosinase.Para obter informações sobre o processo de inativação, a cinética foi calculada por meio de medições de intervalo de tempo e reações contínuas de substrato.Os resultados indicaram que a inativação induzida pela isorhamnetina foi uma reação de primeira ordem com processos bifásicos.Para obter mais informações, simulamos o acoplamento entre tirosinase e isorhamnetin.A simulação foi bem-sucedida (energias de ligação para Dock6.3: -32,58 kcal/mol, para AutoDock4.2: -5,66 kcal/mol e para Fred2.2: -48,86 kcal/mol), sugerindo que a isorhamnetina interage com vários resíduos, como como HIS244 e MET280.Essa estratégia de prever a interação da tirosinase em combinação com a cinética baseada em um composto de flavanona pode ser útil na triagem de potenciais inibidores naturais da tirosinase.

2. A via de desdobramento ácido da conalbumina (CA), uma glicoproteína monomérica da clara de ovo de galinha, foi investigada usando espectroscopia de CD de UV distante e próximo, emissão de fluorescência intrínseca, sonda de fluorescência extrínseca 1-anilino-8-naftaleno sulfonato (ANS) e dispersão de luz dinâmica (DLS).Observamos mudanças dependentes do pH na estrutura secundária e terciária do CA.Possui estrutura secundária α-helicoidal semelhante à nativa em pH 4,0, mas perde a estrutura em pH 3,0.O CA existia exclusivamente como um estado de glóbulo pré-fundido e estado de glóbulo fundido em solução a pH 4,0 e pH 3,0, respectivamente.O efeito do pH na conformação e termoestabilidade do CA aponta para sua resistência ao calor em pH neutro.Os resultados do DLS mostram que o estado MG existia como forma compacta em soluções aquosas com raios hidrodinâmicos de 4,7 nm.A extinção da fluorescência do triptofano pela acrilamida confirmou ainda a acumulação de um estado intermediário, parcialmente desdobrado, entre os estados nativo e desdobrado.