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As proteínas fosfatases de serina/treonina foram descritas em muitas bactérias patogênicas como enzimas essenciais envolvidas em vias de transdução de sinal dependentes de fosforilação e frequentemente associadas à virulência desses organismos.Uma inspeção do genoma de Mycoplasma synoviae revelou a presença de um gene (prpC) que codifica uma suposta proteína fosfatase da subfamília da proteína fosfatase 2C (PP2C).Aqui, relatamos uma caracterização bioquímica completa da fosfatase de M. synoviae (PrpC) e o papel particular dos íons metálicos na relação estrutura-função dessa enzima.A análise da sequência de aminoácidos de PrpC revelou que todos os resíduos envolvidos no centro metálico dinuclear e os resíduos putativos de coordenação do terceiro íon metálico, conservados nas fosfatases PP2C, estão presentes em PrpC.PrpC é uma proteína monomérica capaz de desfosforilar fosfo-substratos com dependência de íons Mn(2+).A análise de estabilidade térmica demonstrou a estabilidade da enzima em temperaturas amenas e a influência dos íons Mn(2+) nesta propriedade.A análise por espectrometria de massa sugeriu que três íons metálicos se ligam a PrpC, dois dos quais com uma aparente constante de alta afinidade.A análise mutacional dos resíduos putativos de coordenação do terceiro metal, Asp122 e Arg164, revelou que essas variantes exibiram uma ligação mais fraca de íons de manganês e que ambas as mutações afetaram a atividade da fosfatase PrpC.De acordo com esses resultados, PrpC é um membro da proteína fosfatase metal-dependente com maior estabilidade na forma holo e com Asp122, possivelmente implicado no terceiro sítio de ligação de metal, essencial para a atividade catalítica.