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A cisteína (Cys) desempenha papéis importantes em muitos processos fisiológicos de células eucarióticas e sua detecção nas células é de importância fundamental.No entanto, glutationa (GSH), homocisteína, N-acetil-L-cisteína e outros tióis dificultam muito a detecção de Cys.Em particular, GSH interfere fortemente com a detecção de Cys celular (30-200 μM) devido à sua alta concentração intracelular (1-10 mM).Neste trabalho, uma sonda fluorescente off-on (HOTA) para a detecção de Cys é apresentada.Esta sonda possui excelente sensibilidade e seletividade satisfatória para detecção de Cys celular: com a adição de 200 μM Cys, a intensidade de fluorescência da sonda (10 μM) aumentou 117 vezes e o limite de detecção foi calculado em 13,47 μM, que é menor que a concentração de Cys celular;a sonda também detectou seletivamente 30–200 μM de cisteína sobre 1–10 mM de glutationa.Consequentemente, experimentos de imagem celular foram realizados com a sonda HOTA.Além disso, os resultados dos experimentos de bloqueio de tiol e inibição da síntese de GSH confirmaram que a emissão intracelular se origina principalmente da interação entre Cys e HOTA.