ONPG CAS:369-07-3 98,0% Min White To Off-White Powder
| Número de catálogo | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Nome do Produto | ONPG(2-Nitrofenil-beta-D-galactopiranósido) |
| Fórmula molecular | C12H15NO8 |
| Peso molecular | 301,25 |
| Detalhes de armazenamento | 2 a 8°C |
| Código Tarifário Harmonizado | 29400000 |
Especificação do produto
| Pureza (HPLC) | mín.98,0% |
| Aparência | Pó branco a esbranquiçado |
| Solução(1% em Água) | Solução límpida, incolor a ligeiramente amarela |
| Teor de Água(Carlos Fischer) | máx.0,5% |
| Rotação óptica específica [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0°C a -73,0°C |
Discussão sobre o teste ONPG (teste de β-galactosidase)
Questões têm sido frequentemente levantadas recentemente: 1. Por que o teste ONPG pode ser usado para distinguir a fermentação retardada da lactose?2. Por que o padrão nacional afirma que é necessário usar 3% de ferro trissacarídeo de cloreto de sódio (ou ferro trissacarídeo) para o teste ONPG?3. Para Vibrio parahaemolyticus, ao realizar o teste OPNG, por que o tolueno deve ser adicionado gota a gota de acordo com o padrão?Qual é a função?
Nossa empresa revisou muitas informações, resumiu e compartilhou com você abaixo:
Princípio: O nome chinês do ONPG é o-nitrobenzeno-β-D-galactopiranósido.O ONPG pode ser hidrolisado em galactose e o-nitrofenol amarelo (ONP) pela β-galactosidase, de modo que a atividade da β-galactosidase pode ser detectada pela mudança de cor do meio de cultura.
A lactose é um açúcar que a maioria dos microorganismos precisa detectar.Seu metabolismo requer duas enzimas, uma é a permease celular, a lactose entra nas células sob a ação da permease;a outra é a β-galactosidase, que hidrolisa a lactose em galactose.Lactose e glicose.A β-galactosidase também pode atuar diretamente no ONPG para hidrolizá-lo em galactose e o-nitrofenol amarelo (ONP).Pode ser feito em 24h, mesmo com fermentadores retardados à lactose.Portanto, explica os resultados da observação de colher a cultura 1 do ágar inclinado e inoculá-la em um círculo completo a 36°C por 1-3h e 24h.Se β-galactosidase for produzida, ela ficará amarela em 1-3h, se não houver tal enzima, não mudará de cor em 24h.
De acordo com as duas enzimas acima, os microorganismos podem ser divididos nas seguintes categorias:
1 bactéria fermentadora de lactose (18-24 horas) com permease e β-galactosidase P + G +;
2 Fermentadores de lactose retardados (levando mais de 24 horas) sem permease, mas possuindo galactosidase: P- G+.
3 Fermentadores não-lactose sem permease e galactosidase: P- G-.
O teste ONPG pode ser usado para distinguir bactérias que fermentam a lactose (P-G+) de bactérias que não fermentam a lactose (PG-), como:
1 Diferencie fermentadores tardios de lactose (P- G+) de não fermentadores de lactose (P- G-).
(a) Citrobacter (+) e Salmonella arizonae (+) de Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) de Shigella sonnei (-).
Por que o ensaio ONPG foi realizado usando uma cultura durante a noite em trissacarídeo férrico de cloreto de sódio a 3% (trissacarídeo de ferro)?Nossa empresa consultou muitas informações, mas não há uma declaração clara.Apenas no site da FDA, está escrito que "Inocule as culturas a serem testadas em ágar-ágar de açúcar triplo e incube por 18 h a 37°C (ou outra temperatura apropriada, se necessário). Nutrientes (ou outros) ágar-ágar inclinados contendo 1,0 % de lactose também pode ser usado."significa: as bactérias teste foram inoculadas no meio trissacarídeo ferro e cultivadas a 37°C por 18h.Meios nutritivos de agar slant (ou outro) contendo 1% de lactose também são aceitáveis.Portanto, infere-se que o meio de ferro trissacarídeo contém lactose.Após o crescimento durante a noite, as bactérias produziram uma boa β-galactosidase ativa.Usando essas bactérias, o ONPG pode ser decomposto pela β-galactosidase mais rapidamente.O fenômeno experimental é mais rápido e melhor manifestado.Além disso, a adição gota a gota de tolueno e um banho de água por 5 min são todos para liberar totalmente a β-galactosidase.
