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A gravidade da resistência microbiana combinada com a falta de novos antimicrobianos aumentou o interesse no desenvolvimento de peptídeos antimicrobianos (AMPs) como novas terapêuticas.Neste estudo, avaliamos as atividades antimicrobianas de dois peptídeos sintéticos curtos, a saber, RRIKA e RR.Esses peptídeos exibiram potente atividade antimicrobiana contra Staphylococcus aureus, e seus efeitos antimicrobianos foram significativamente aumentados pela adição de três aminoácidos no terminal C, o que consequentemente aumentou a anfipaticidade, hidrofobicidade e carga líquida.Além disso, RRIKA e RR demonstraram um efeito bactericida significativo e rápido contra isolados de Staphylococcus resistentes a medicamentos e clínicos, incluindo Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), S. aureus intermediário à vancomicina (VISA), S. aureus resistente à vancomicina (VRSA) , S. aureus resistente à linezolida e Staphylococcus epidermidis resistente à meticilina.Em contraste com muitos AMPs naturais, RRIKA e RR mantiveram sua atividade na presença de concentrações fisiológicas de NaCl e MgCl2.Tanto o RRIKA quanto o RR aumentaram a morte da lisostafina em mais de 1.000 vezes e erradicaram os isolados de MRSA e VRSA em 20 minutos.Além disso, os peptídeos apresentados foram superiores na redução de biofilmes aderentes de S. aureus e S. epidermidis em comparação aos resultados com antibióticos convencionais.Nossos achados indicam que os efeitos estafilocidas de nossos peptídeos foram através da permeabilização da membrana bacteriana, levando ao vazamento do conteúdo citoplasmático e à morte celular.Além disso, os peptídeos não eram tóxicos para as células HeLa em 4 a 8 vezes suas concentrações antimicrobianas.As atividades antimicrobianas potentes e insensíveis ao sal desses peptídeos apresentam um candidato terapêutico atraente para o tratamento de infecções por S. aureus multirresistentes.