Produtos

Desenvolvemos um novo sistema de entrega de RNA de pequena interferência (siRNA) usando um complexo ternário com polietilenoimina (PEI) e ácido γ-poliglutâmico (γ-PGA), que apresentou efeito silenciador e sem citotoxicidade.Os complexos binários de siRNA com PEI tinham aproximadamente 73-102 nm em tamanho de partícula e 45-52 mV em potencial ζ.O efeito silenciador dos complexos siRNA/PEI aumentou com um aumento de PEI, e os complexos siRNA/PEI com uma razão de carga superior a 16 mostraram knockdown significativo da luciferase em uma linha celular de carcinoma de cólon de camundongo expressando regularmente luciferase (células Colon26/Luc).No entanto, forte citotoxicidade e aglutinação sanguínea foram observadas no complexo siRNA/Lipofectamina e no complexo siRNA/PEI16.A recarga de complexos catiônicos com um composto aniônico foi relatada como um método promissor para superar essas toxicidades.Portanto, preparamos complexos ternários de siRNA com PEI (taxa de carga 16) pela adição de γ-PGA para reduzir a citotoxicidade e entregar siRNA.Como esperado, a citotoxicidade dos complexos ternários diminuiu com o aumento do conteúdo de γ-PGA, o que diminuiu o potencial ζ dos complexos.Um forte efeito silenciador comparável ao complexo siRNA/Lipofectamina foi descoberto em complexos ternários incluindo γ-PGA com uma carga de superfície aniônica.A alta incorporação de complexos ternários nas células Colon26/Luc foi confirmada com microscopia de fluorescência.Tendo alcançado o knockdown de um gene transfectado exogenamente, a capacidade do complexo para mediar o knockdown de um gene de manutenção endógeno, gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH), foi avaliada em células B16-F10.O complexo ternário (complexo siRNA/PEI16/γ-PGA12) exibiu um efeito knockdown significativo de GAPDH.Assim, desenvolvemos um sistema de entrega de siRNA útil.