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Quimifluorescência: O luminol molecular é uma molécula quimicamente fluorescente que pode ser convertida em ácido aminoftálico em estado excitado na presença de moléculas de peróxido de hidrogênio, que emite forte fluorescência.O peróxido de hidrogênio é o produto de muitas reações biooxidativas, por isso é fácil vincular essas reações biooxidativas à fotodetecção pela introdução de luminol.Por exemplo, a sonda de glicose oxidase/catalase pode detectar a concentração de peróxido de hidrogênio ou glicose na amostra e o tempo de resposta é de apenas 0,5s (método dinâmico).A combinação de substâncias quimioluminescentes com reações imunológicas e a expressão da concentração dos componentes imunes detectados por meio de reações luminosas é chamada de tecnologia de imunoensaio quimioluminescente.Em 1976, Shmeder propôs imunoensaio de quimioluminescência, usando luminol-H202 e seu derivado ABEI como sistema de exibição de reação de detecção.Atualmente, o luminol e seus derivados são os marcadores mais comumente usados ​​em aplicações de imunoensaios de quimioluminescência.Em condições alcalinas, catalisadas pela microperoxidase, um grande número de fótons pode ser liberado.O luminol pode ser usado para WesternBlot de anticorpos marcados com HRP e detecção de hibridação de ácido nucleico de sondas marcadas com HRP.Também é usado na detecção de manchas de sangue de detetives criminais modernos.Um composto que pode ser usado como marcador quimioluminescente deve atender às seguintes condições: o rendimento quântico da luminescência é alto;suas propriedades físico-químicas condizem com o sistema em estudo;sua reação luminescente é o resultado da reação de oxidação da substância luminescente;dentro da faixa de concentração utilizada Internamente não tóxico para os organismos vivos.Vários tipos de reagentes de quimioluminescência são comumente usados: éster de acridina, um marcador de quimioluminescência amplamente utilizado, é um composto orgânico tricíclico, fácil de oxidar, e a reação de oxidação não requer catalisador e libera fótons a 430 nm;Luminol e isoluminol e seus derivados são os agentes quimioluminescentes mais maduros.Já em 1964, enquanto relatado em quimioluminescência, luminol, isoluminol e seus derivados foram usados ​​para quimioluminescência.Os imunoensaios têm alcançado melhores resultados.Detecção de luminescência: o comprimento de onda de fluorescência ideal é de 400nm (detecção de quimioluminescência em solução de 60mmK2S2O8, 100mmK2CO3, pH11,5)

Quimiluminescência: Como um método de ensaio sensível, a quimioluminescência é amplamente utilizada para detectar radicais livres e metabólitos de reação produzidos em enzimas, células e organismos biológicos.A luz emitida por seus produtos de oxidação e metabólitos pode ser utilizada com diversos fotômetros.detecção.A quimiluminescência é amplamente utilizada na triagem e pesquisa de antioxidantes, como polifenóis, polissacarídeos, flavonoides e antraquinonas, devido à sua sensibilidade, rapidez, operação simples e baixo preço.Os sistemas de quimioluminescência comumente usados ​​para a determinação de ânions superóxido incluem xantina oxidase-luminol, pirogalol-luminol e dimetil sulfóxido-luminol.O primeiro é um sistema enzimático e os dois últimos é um sistema não enzimático.Os sistemas de quimioluminescência para a determinação de radicais hidroxila incluem principalmente sulfato de cobre-levedura (ou células da medula óssea)-ácido ascórbico-peróxido de hidrogênio, tampão CuCl-H2O2-o-fenantrolina-carbonato, sulfato de cobre-o-fenantrolina-ácido ascórbico-hidrogênio sistemas de quimioluminescência de peróxido 5, sulfato ferroso-luminol-peróxido de hidrogênio e sulfato ferroso-luminol, todos envolvem a reação clássica de Fenton para gerar radicais hidroxila e, em seguida, atacam o agente luminescente para gerar quimioluminescência, que pode ser usada para medir a remoção de extratos. atividade de radicais reativos de oxigênio.Método experimental: usar o sistema de quimioluminescência de pirogalol-luminol: o luminol é transformado em solução de concentração de 0,05 mol/L com solução de NaOH de 0,05 mol/L, armazenado em local escuro e água bidestilada antes de usar Diluir para solução de 1mmol/L, use 1mmol/ L HCl para fazer uma solução de 0,01mol/L de pirogalol, armazene-a na geladeira a 4°C e dilua-a com água bidestilada até 16 vezes a solução 6,25×10-4mol/L antes de usar.O tampão 0,05mol/L pH10,2Na2CO3-NaHCO3 (contendo 0,1mmol/LEDTA) foi preparado antes do uso e misturado com 1mmol/L luminol a 2:1 (fração de volume) para formar luminol e tampão carbonato antes da mistura experimental.Durante a medição, injete 10,0 μL de amostras de diferentes concentrações (0, 0,08, 0,4, 2 e 10 mg/mL) na célula luminescente (com o tampão de amostra como controle) e, em seguida, injete 6,25 × 10-4 mol/L de pirogalol 0,05 Finalmente, 0,94 mL de uma mistura de luminol e tampão de ácido carbônico foram adicionados para iniciar a reação (30°C), a intensidade de luminescência foi contada em intervalos de 2 s e a intensidade de luminescência total integrada em 300 s foi medida.A intensidade da luminescência de fundo foi a luminescência quando o pirogalol não foi adicionado.valor.Além disso, existem quimiluminescência, espectroscopia de fluorescência e sistema de quimioluminescência NBS-diclorofluoresceína para a determinação da quimioluminescência de fluorescência, etc., sua maior vantagem é a alta sensibilidade.

Propriedades Químicas: Pó cristalino amarelo.Facilmente solúvel em lixívia, solúvel em ácido diluído, quase insolúvel em água e insolúvel em álcool.Soluções neutras ou levemente ácidas exibem forte fluorescência azul brilhante quando expostas à luz ultravioleta.Ponto de fusão 329-332℃

Usos: Como reagente e indicador de análises químicas.Use reagente de detecção de análise de quimioluminescência (como determinação de cátions metálicos ou sangue)

Usos: Para análise de quimioluminescência, como: cátions metálicos, sangue e glicocorticóides

Usos: Teste de luminescência: Emmax440nm (quimioluminescência; 60mmK2S2O8, 100mmK2CO3, pH11,5; após a adição de H2O2) reagente e indicador de quimioluminescência, comumente usado em análises de quimioluminescência, como cátions metálicos, imunidade sanguínea, etc.